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La Porphyrie Erythropoïétique Congénitale : vers la recherche de nouvelles cibles thérapeutiques à l’aide du système CRISPR-Cas9

La porphyrie érythropoïétique congénitale (PEC) est une maladie rare de transmission autosomique récessive, caractérisée par un déficit en uroporphyrinogène III synthase (UROS), la quatrième enzyme de la voie de biosynthèse de l’hème. Les découvertes récentes suggèrent l’existence de gènes modificateurs importants dans la PEC. L’identification de ces gènes et la connaissance des mécanismes cellulaires par lesquels ils seraient impliqués dans la PEC et la biosynthèse de l’hème sont essentiels afin d’élaborer de nouvelles stratégies thérapeutiques. La découverte de la technologie CRISPR-Cas9 a permis de réaliser des criblages génomiques rapides et efficaces en utilisant l’endonucléase Cas9 avec des banques d’ARNg, accélérant ainsi considérablement notre compréhension des processus pathologiques de nombreuses maladies.

L’objectif de ce projet est d’identifier de nouveaux gènes impliqués dans la modulation de la voie de biosynthèse de l’hème en transduisant des cellules saines et des cellules modélisant la maladie à l’aide de la librairie GeCKO (Genome-Scale CRISPR Knock-Out). Afin de réaliser le criblage, des lignées cellulaires exprimant la Cas9 ont été créées et les conditions d’expérimentation du tri cellulaire ont été définies en se basant sur le caractère fluorescent des cellules porphyriques. Les cellules d’intérêt seront par la suite sélectionnées et analysées génétiquement par NGS (Next Generation Sequencing). Les gènes et les mécanismes cellulaires identifiés pourront faire l’objet d’une thérapie ciblée de la PEC.

Mots-clés libres : porphyrie érythropoïétique congénitale, criblage génomique, CRISPR-Cas9.

Rameau (langage normalisé) :
• Porphyrie érythropoïétique congénitale
  
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